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品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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  • 肺炎克雷伯菌PCR試劑盒

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW38758
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫存:100
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產(chǎn)品及特點(diǎn):
肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pnenmoniae)是腸桿菌科克雷伯氏菌屬中最為重要的一類菌(俗稱肺炎桿菌),其所致疾病占克雷伯氏菌屬感染的 95%以上。常存在于人體上呼吸道和腸道,當(dāng)機(jī)體抵抗力降低時,便經(jīng)呼吸道進(jìn)入肺內(nèi)而引起大葉或小葉融合性實(shí)變,是腸桿菌科克雷伯菌屬中對人致病性較強(qiáng)的重要條件致病菌和醫(yī)源性感染菌。
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增肺炎克雷伯菌,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:

編號

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1mL(亮黃色)

試劑三

肺炎克雷伯菌PCR引物混合液

100μL(白蓋)

試劑四

肺炎克雷伯菌PCR陽性對照(1×10E8 /μL)

50μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 肺炎克雷伯菌 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分

成份

N+2個樣品管

PCR陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

肺炎克雷伯菌PCR引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR陰性對照(水)

--

18μL

--

PCR陽性對照(肺炎克雷伯菌PCR陽性對照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng): 

過程

溫度

時間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)35個循環(huán)

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示:
本公司的所有產(chǎn)品,僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!