測(cè)定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
線(xiàn)粒體是細(xì)胞呼吸代謝的重要場(chǎng)所,位于線(xiàn)粒體內(nèi)膜的 H?-ATP 酶是氧化磷酸化偶聯(lián)的關(guān)鍵組分。H?-ATP 酶可催化 ATP 水解生成 ADP 和無(wú)機(jī)磷,本試劑盒通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定該酶活性高低。
[注]:全程操作需無(wú)磷環(huán)境;試劑配置最好用新的槍頭和玻璃移液器等,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
線(xiàn)粒體H?-ATP酶活性檢測(cè):
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作過(guò)程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(5μmol/mL):標(biāo)準(zhǔn)品用 10mL 蒸餾水溶解。(母液需在兩天內(nèi)用)。
2. 把母液稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5μmol/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 依據(jù)顯色反應(yīng)階段測(cè)定管的加樣體系操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。